以蘆丁標準品做標準曲線為什麽要用亞硝酸鈉溶液,硝酸鋁溶液,氫氧化鈉溶液

這些構成顯色劑，按順序依次加入5%亞硝酸鈉溶液，10%硝酸鋁溶液，5%氫氧化鈉溶液可以使蘆丁顯色（橙紅色）。通常用於總黃酮的含量測定，其原理是：黃酮中的處於相鄰羰基、羥基可以***同絡合金屬而顯色。根據顯色之深淺（即吸光度A值之大小），判斷的總黃酮含量之高低。常用的顯色劑是亞硝酸鈉-硝酸鋁，檢測波長是508nm。步驟:

樣品液 0.5mL（具體的用量視樣品液的濃度而定）→加5%亞硝酸鈉溶液0.15mL

靜置6min→加10%硝酸鋁溶液0.15mL

靜置6min→加4%氫氧化鈉溶液2mL

→加蒸餾水2.2mL（蒸餾水用於稀釋和調總體積，要使待測混合液的總體稱為5mL，2.2mL是暫定的）→待測混合液總體積5mL

→振蕩，混勻→靜置3min→分光光度計測A值（測定波長508nm）。

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