當前位置:偏方大全网 - 藥品說明 - GUS染色方法

GUS染色方法

Gus 基因存在於某些細菌體內,編碼β-葡萄糖苷酸酶(β-glucuronidase,GUS),該酶是壹種水解酶,能催化許多β-葡萄糖苷酯類物質的水解。因為絕大多數植物細胞內不存在內源的GUS活性,因此gus基因廣泛用作轉基因植物的報告基因,尤其是在研究外源基因瞬時表達的轉化實驗中廣泛應有。此外,gus基因3’端與其他結構形式的融合基因也能夠正常表達,所產生的融合蛋白仍具有GUS活性,這對研究外源基因表達的具體細胞部位提供了方便條件,也是它相對於其他報告基因的壹個優點。 在適宜條件下,該酶可將 X-Gluc 水解生成藍色物質,初始產物並不帶顏色,為無色的吲哚衍生物,後經氧化二聚作用形成 5,5’-二溴-4,4’-二氯 靛藍染料,此靛藍染料使具有GUS活性的部位或位點呈現藍色,可用肉眼或在顯微鏡下觀察到。壹般用來顯示某基因的組織表達模式。

以上這些試劑除了EDTA,其他試劑配制比較簡單。下面是這些試劑配制的具體方法:

取上壹步配制好的GUS染液,將妳的樣品加入其中,然後用錫箔紙包起來,放置於37℃,12h-16h左右,就可以看到靛藍色。染色具體時間依據實驗設計而定,可靈活變動。

使用顯微鏡進行染色結果的記錄,拍照可以調整幾個參數,曝光值,自動白平衡,基本就這兩個參數,盡量將背景拍得明亮壹些,顯得幹凈。拍攝之後要記得添加標尺scale,壹般需要調整為壹致的標尺。

  • 上一篇:泰興市淩鑫機電設備有限公司怎麽樣?
  • 下一篇:Rezumab是壹種進口藥物。
  • copyright 2024偏方大全网