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高效液相色譜法(HPLC)測定茶葉中有效成分的含量

高效液相色譜操作步驟:

1).過濾流動相,根據需要選擇不同的濾膜。

2).對過濾後的流動相進行超聲波脫氣 10-20 分鐘。

3).打開 HPLC 工作站(包括計算機軟件和色譜儀),連接流動相管路並連接檢測系統。

4).進入 HPLC 控制界面的主菜單,點擊 MANUAL 進入手動菜單。

5) . 如果壹段時間沒有使用,或者更換了新的流動相,需要先沖洗泵和進樣閥。沖洗泵時,直接在泵出口處用針抽取。沖洗進樣閥,需要在手動菜單中,先點擊吹掃,再點擊開始,沖洗時速度不要超過 10 毫升/分鐘。)調整流速,第壹次使用新的流動相時,可以先試試壓力,流速越大,壓力越大,壹般不要超過 2000。點擊傷害,選擇合適的流速,點擊上,轉到基線,觀察基線情況。

7).設計采樣方法。單擊文件,選擇用戶和方法,您可以選擇各種現有的采樣方法。如果需要創建新方法,請單擊新方法,根據需要選擇所需的附件,包括註射閥、泵、檢測器等。選擇完畢後,點擊協議。壹個完整的采樣方法需要包括:a. 進樣前的流量穩定,通常為 2-5 分鐘;b. 基線歸零;c. 進樣閥的加載-進樣轉換;d. 采樣時間,不同的樣品采樣時間不同。

8).樣品註入和註入後操作。選擇方法,點擊開始,進樣,所有樣品都需要過濾。方法結束後,點擊後運行,可以記錄數據和標記等。所有樣品完成後,再使用後運行功能。所有樣本都走完後,再用上述方法走基線,洗掉剩余的材料。

9).關機時,先關閉計算機,再關閉液相色譜儀。

10) . 填寫登記表,並由負責人簽字。

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