thinlayer chromatography (TLC) [Landau Chinese-English Dictionary]
thin layer chromatography [21st Century Bilingual Dictionary of Science and Technology]
TLC [Landau Chinese-英漢詞典]
板層色譜法[湘雅醫學詞典]
薄層色譜法[湘雅醫學詞典]
3 小結薄層色譜法又稱薄層色譜法。它是將吸附劑或載體均勻地塗布在玻璃板、塑料板或鋁基板上形成壹均勻薄層，待斑點顯現、展開後，與適當的對照品按相同的方法在同壹板上進行色譜比較，並可用薄層掃描儀掃描，用於藥物鑒別、雜質檢查或含量測定的方法。按分離機理可分為吸附法、分布法、離子交換法、凝膠過濾法等。適用於痕量樣品的分離鑒定，具有分離速度快、分離效率高等特點。
4 薄層色譜法定義薄層色譜法是在薄層板上對試液進行點樣，展開後觀察色譜圖，並與合適的對照品按相同方法得到的色譜圖進行比較，用於藥品的鑒定或雜質檢查[1]。
5 薄層色譜的儀器和材料 5.1 薄層板自制薄層板？除非另有說明，否則要求玻璃板光滑、平整、無水滴且經過清洗和幹燥。最常用的固定相有矽膠 G、矽膠 GF254、矽膠 H 和矽膠 HF254，其次還有矽藻土、矽藻土 G、氧化鋁、氧化鋁 G、微晶纖維素、微晶纖維素 F254 等。
薄層塗料，壹般可分為無粘性和含粘性兩種。前者是將固定相直接塗布在玻璃板上，後者是在固定相中加入壹定量的粘結劑，壹般采用10%～15%的煆燒石膏（CaSO4-2H2O在140℃加熱4小時），加水適量攪拌使用，或將羧甲基纖維素鈉水溶液（0.2%～0.5%）適量調成糊狀，均勻地塗布在玻璃板上。使用塗布機塗布時應能使固定相在玻璃板上塗布成壹層厚度要求均勻的薄層。
市售薄層板？分為普通薄層板和高效薄層板，如矽膠薄層板、矽膠GF254薄層板、聚酰胺薄膜和鋁基板薄層板等。高效薄層板的粒度壹般為 5-7μm。
5.2 采樣裝置常用帶支架的微量註射器或定量毛細管，應能使點樣位置正確、集中。
5.3 擴容器應選用與平板大小相適應的玻璃薄層色譜擴容筒，筒蓋應嚴密，底部平整光滑或有雙凹槽。
5.4 顯色劑見各品種項下的規定。可用噴霧顯色、浸漬顯色或置於蒸汽中的相應試劑熏蒸顯色，用於檢測斑點。
5.5 噴淋顯色裝置噴淋顯色要求用壓縮氣體使顯色劑呈均勻
細霧噴淋；浸漬顯色可用專用玻璃器皿或用合適的玻璃圓筒代替；蒸汽熏蒸顯色可用雙槽玻璃圓筒或適當大小的幹燥器代替。
5.6 觀察裝置觀察裝置是裝有可見光、短波紫外（254nm）、長波紫外（365nm）光源和相應濾光片的暗箱，可連接攝像設備進行色譜圖的拍攝，暗箱中的光源應有足夠的照度。
6 薄層色譜 6.1 薄層板制備自制薄層板？除另有規定外，將1份固定相和3份水在研杵中同向研磨混合，除去表面氣泡，倒入塗布器中，在玻璃板上平滑移動塗布器進行塗布（厚度為0.2～0.3mm），取出塗好薄層的玻璃板，置於水平臺上常溫幹燥，在110℃下活化30分鐘，即放入幹燥劑幹燥器中備用。使用前檢查其均勻性（可通過透射光和反射光觀察）。
市售薄層板？壹般來說，使用前應在 110°C 下活化 30 分鐘。聚酰胺薄膜不需要活化。鋁基材薄層板可根據需要切割，但必須註意切割後薄層板底邊的矽膠層不能破損。如果存放期間受到空氣中雜質的汙染，可在展開前使用合適的溶劑在容器中向上展開預洗，110℃活化，置於幹燥器中備用。
6.2 取樣除另有規定外，用取樣器在薄層板上點樣，壹般為點取樣，點取樣基線距底邊2.0cm，取樣點直徑為2～4mm（高效薄層板為1～2mm），點間距視點擴散情況以不影響檢測為宜，壹般為1.0～2.0cm（高效薄層板不得小於5mm）。點樣時壹定要註意不要損傷薄層板表面。
6.3 擴樣擴樣時如需在圓筒內預先浸入展平劑，可在圓筒內加入足量的展平劑，必要時可在圓筒內壁上用同高同寬的兩張濾紙條，將其壹端浸入展平劑中，封上頂蓋，使系統平衡或按規定下相應品種操作。
將點好試料的薄層板放入展開缸中，浸入展開劑的深度為距薄層板底邊 0.5～1.0cm（不要將取樣點浸入展開劑中），封上頂蓋，待展開至適當展開度（如：20cm的薄層板，鋪展距離壹般為10～15cm；10cm的高效薄層板，鋪展距離壹般為5cm左右），取出薄片，晾幹，按品種規定下操作。烘幹後，按規定品種下試驗。
展開可以是單向展開，即在壹個方向上展開；也可以是雙向展開，即先在壹個方向上展開，取出後，待膨脹劑完全揮發後，將板材翻轉 90°，再用原膨脹劑或另壹種膨脹劑進行展開；還可以反復展開。
6.4 顯色和顯像熒光板可采用熒光猝滅法；普通平板，有色物質可直接檢測，無色物質可采用物理或化學方法檢測。物理法是檢測熒光點的顏色和強度；化學法壹般用化學試劑顯色，並立即覆蓋在同樣大小的玻璃板上，進行檢驗。
7 系統適用性試驗根據各檢測品種的要求對薄層色譜法下的系統進行適用性試驗，使色譜斑的檢測靈敏度、比移值（Rf）和分離效率符合規定。
7.1 檢測靈敏度是指在雜質檢查時，試液中被測物質可被檢出的最低量。壹般用對照品溶液稀釋若幹倍，用供試品溶液與對照品溶液在規定的色譜條件下，在同壹薄層板上點樣、展開、檢查，前者應顯示清晰的斑點。
7.2 比移值（Rf）指基線到展開斑點中心的距離與基線到展開劑前端的距離之比。鑒別時，可用供試品溶液主斑與對照品溶液主斑的比移值進行比較，或用比移值來說明主斑或雜質斑的位置。
除非另有規定，比移值（Rf）應介於 0.2 和 0.8 之間。
7.3 分離效果鑒別時，在由對照品和結構相似藥物對照品制成的混合對照品溶液的色譜圖中應顯示兩個明顯分離的斑點。雜質檢查方法的選擇，可將雜質對照品本身稀釋後制成對照品溶液溶入混合對照品溶液中，也可將雜質對照品與受試組分制成的對照品溶液溶入混合對照品溶液中，還可采用對受試品用適當降解方法得到的溶液，將上述溶液點樣展開制成色譜圖，應顯示兩個明顯分開的斑點。
8 檢測 8.1 鑒別薄層色譜法進行鑒別時，可采用相同濃度的對照品溶液，在同壹薄層板上點樣、展開、檢查，供試品溶液主斑點的顏色（或熒光）及位置應與對照品溶液主斑點的顏色（或熒光）及位置相同，主斑點的大小及色澤應大致相同。或用供試品溶液與對照品溶液等體積混合，應顯現單個、緊密的斑點；或選用與供試品化學結構相似的藥物對照品與供試品溶液的主斑點比較，兩者的 Rf 應不同，或將上述兩種溶液等體積混合，應顯現兩個明顯分開的斑點。
8.2 雜質檢查薄層色譜法進行雜質檢查時，可采用雜質對照法、供試品溶液自身稀釋對照法或兩種方法同時進行。主斑以外的供試液應與相應雜質對照品溶液或系列濃度的雜質對照品溶液的相應主斑比較，或與供試液自身稀釋對照品溶液或系列濃度的自身稀釋對照品溶液的相應主斑比較，不得較暗。
通常應註明斑點的數量和單個雜質的含量，或在使用系列自稀釋對照溶液時註明雜質的估計總量。
9 薄層掃描是指用壹定波長的光照射在薄層板上，對薄層色譜中已吸收紫外光或可見光的斑點，或經激發後能發出熒光的斑點進行掃描，掃描的光譜和積分數據用於藥物的鑒別、雜質檢查或含量測定。
除另有規定外，薄層掃描法可根據各種薄層掃描儀的結構特點和使用說明，結合具體情況，選擇反射法、吸收法或熒光法，用雙波長或單波長掃描。有內標法和外標法之分，由於影響薄層掃描結果的因素很多，所以薄層掃描的定量測定應在保證試樣量在校正曲線線性範圍內的情況下，用與對照品相同的平板點樣、展開、掃描、測定和計算。