1.玻璃器皿的洗滌：
各種玻璃器皿均應先用洗衣粉洗凈後，清水沖洗幹凈，放入洗液中浸24小時後用清潔水沖洗幹凈，再經蒸餾水沖洗壹次，然後放入烘箱中烘幹備用。
洗液的配制：壹般采用重鉻酸鉀50克，加入蒸餾水10毫升，加溫溶化，冷卻後再緩緩註入90毫升工業硫酸。
2.培養基的制備：
（1）培養基的組成：主要成分包括各種無機鹽（大量元素和微量元素）、有機化合物（蔗糖、維生素類、氨基酸、核酸或其他水解物等）、螯合劑（EDTA）和植物激素。固體培養基還應加入瓊脂使培養基固化。
經常使用的培養基，可先將各種藥品配成10倍或100倍的母液，放入冰箱中保存，用時再按比例取用。
①大量元素：將藥品稱取之後，分別溶解再依順序混合定溶，配成10倍濃度的母液，每配制1毫升培養基時取母液100毫升。
②微量元素：微量元素用量少，為精確、方便稱取，常配成100倍或1000倍的母液。每配制1毫升培養基時取母液10毫升或1毫升。
③有機化合物類，同微量元素壹樣，可配成100倍或1000倍的母液，使用時每1毫升培養基中取用10毫升或1毫升。
④鐵鹽（螯合劑）：鐵鹽是單獨配制的，由硫酸亞鐵5.57克和乙二銨四乙酸二鈉7.45克，溶於1毫升水中配成，每配制1毫升培養基取用5毫升。
⑤植物激素：壹般將植物激素配制成0.1～0.5毫克/毫升的溶液。由於植物激素多數難溶於水，可采用以下方法：
萘乙酸（NAA）：可溶於熱水中或先溶於少量95%酒精中，再加水至壹定濃度。
吲哚丁酸（IBA）：先用少量0.4%的NaOH溶液溶解，再加水到壹定濃度。
吲哚乙酸（IAA）：先溶於少量95%酒精中，再加水到壹定濃度。
2，4-D先用少量3.65%的HCl溶液溶解，再加水到壹定濃度。
細胞分裂素：6-芐基嘌呤（6-BA）、激動素（KJ）需用3.65%的HCl或0.4%NaOH溶液先溶解後，再加水到壹定濃度。
以上所配制的各種母液或單獨配制的各種藥液，均應放入2～4℃冰箱中保存，以防變質或微生物的汙染。培養基中的蔗糖和瓊脂，可依需要量隨用隨稱取。
（2）培養基的配方：植物組織培養成功與否，在壹定程度上決定於培養基的選擇。不同培養基由於所含無機鹽的量不同，其實驗材料的反應也有差異。植物組織培養常用的培養基為MS培養基。鐵鹽的使用，除允許培養基用檸檬酸鐵10毫克/毫升外，其余培養基都用鐵鹽母液5毫克/毫升。
表6-13常用培養基營養成分（單位：毫克/千克）
常用培養基營養成分（單位：毫克/千克）（續）-1
（3）培養基的制備程序：配置培養基時，首先按需要量依次吸取各種藥液，混合在壹起。將蔗糖放入溶化的瓊脂中溶解，然後註入混合液，攪拌均勻後用0.4%的NaOH或3.65%的HCl溶液調節pH，再分裝於三角瓶等培養容器內，用錫薄紙、羊皮紙等將容器口封緊包好。最後將分裝後的培養基，放入高壓滅菌鍋中滅菌，壹般采用1.1千克/厘米壓力消毒滅菌15～20分鐘，取出冷卻凝固後備用。不同培養基在滅菌前應做好標記，防止混亂。
培養基的制作程度
3.接種：
常用消毒劑效果比較
為了得到無菌材料，在接種前必須先對植物材料進行消毒。壹般采用化學試劑進行表面消毒。試劑選擇及處理時間的長短，依植物材料對試劑的敏感性來決定，並且要選用消毒後容易除去的藥劑，防止產生藥害，影響愈合組織的發生。常用的消毒藥劑有漂白粉（次氯酸鈣）、安替福民（次氯酸鈉），升汞等（表6-14）。在材料放入消毒劑之前，先用自來水沖洗或先在70%酒精中漂洗壹下，有利於消毒劑滲入植物材料並殺死微生物，放入消毒劑消毒後，必須用無菌水認真沖洗幾次，再進行接種。由於植物種類及所選用的植物器官或植物組織不同，在消毒順序和消毒時間上也各不同。
接種用的植物材料（外植體）的大小和形狀沒有嚴格限制，但不能太小，過小細胞分裂難以發生。因此，壹般要求切塊的大小要適當。接種的全過程都應在無菌條件下進行。目前都是在超凈工作臺上完成，將植物材料接入培養基中即可。
4.培養：
植物組織培養和栽培植物壹樣，也受溫度、光照、培養基的pH等各種環境條件的影響，培養中應嚴格控制培養室的條件。由於植物的種類，所取植物材料部位等的不同，所要求的環境條件也有差異。壹般培養室保持在25±2℃的恒溫條件，低於15℃培養物的生長停滯，高於35℃時對生長不利；光照強度為2000勒克斯，光照時間為10～12小時；對培養室內的濕度，壹般不加控制，因裝有培養基的容器內的濕度基本上能滿足要求，外界環境的濕度過高容易造成汙染；組培中培養基的pH通常為5.5～6.5。pH在4.0以下，7.0以上對生長都不利。培養不同的植物，選用不同的培養基所要求的pH也不同。
植物組織培養能否成功，選擇適合的培養基極為重要。愈合組織的生長、分化和生根，又取決於培養基中激動素和生長素的含量，過高過低都不利於生長。
組培成苗的順序為：
5.移栽：
組培幼苗移栽成活，是獲得大批組培苗的最後壹個重要環節，常因移栽不當而遭到損失。通常試管苗具有3～5條根後即可移栽。但長期在瓶內無菌條件下培養的小苗，直接移到室外，必須經過壹個過度階段。移栽前可將試管苗先打開，放在與培養條件相近的光照充足處，鍛煉3～5天，使其適應環境後再移栽。移栽時用清水洗去根上的瓊脂再栽入盆中，栽植土可選用通氣好的粗砂、蛭石、珍珠巖均可，為保持溫度，可用塑料薄膜覆蓋，這樣在室內保持10～30天，就可移至大田正常生長。由組培苗改為盆栽苗又是組培育苗成敗的關鍵之壹，因此，應控制好溫度、濕度及光照。各種植物對環境條件的要求不同，應區別對待。