GB4789.3-2016《食品安全國家標準食品微生物學檢驗大腸菌群計數》中的規定操作步驟：
1、乳糖發酵試驗：樣品稀釋後，選擇三個稀釋度，每個稀釋度接種三管乳糖膽鹽發酵管。36±1℃培養48±2h，觀察是否產氣。
2、分離培養：將產氣發酵管培養物轉種於伊紅美藍瓊脂平板上，36±1℃培養18-24h，觀察菌落形態。
3、證實試驗：挑取平板上的可疑菌落，進行革蘭氏染色觀察。同時接種乳糖發酵管36±1℃培養24±2h，觀察產氣情況。
SN0169-92《中華人民***和國進出口商品檢驗行業標準出口食品中大腸菌群、糞大腸菌群和大腸桿菌檢驗方法》規定操作：
1、推測試驗：樣品稀釋後，選擇三個稀釋度，每個稀釋度接種三管LST肉湯。36±1℃培養48±2h，觀察是否產氣。
2、證實試驗：將產氣管培養物接種煌綠乳糖膽鹽（BGLB）肉湯管中，36±1℃培養48±2h，觀察是否產氣。以BGLB產氣為陽性。查MPN表，報告每ml(g)樣品中大腸菌群的MPN值。
擴展資料：
大腸菌群並非細菌學分類命名，而是衛生細菌領域的用語，它不代表某壹個或某壹屬細菌，而指的是具有某些特性的壹組與糞便汙染有關的細菌，這些細菌在生化及血清學方面並非完全壹致。壹般認為該菌群細菌可包括大腸埃希氏菌、檸檬酸桿菌、產氣克雷白氏菌和陰溝腸桿菌等。
大腸菌群是作為糞便汙染指標菌提出來的，主要是以該菌群的檢出情況來表示食品中有否糞便汙染。大腸菌群數的高低，表明了糞便汙染的程度，也反映了對人體健康危害性的大小。
糞便是人類腸道排泄物，其中有健康人糞便，也有腸道患者或帶菌者的糞便，所以糞便內除壹般正常細菌外，同時也會有壹些腸道致病菌存在，因而食品中有糞便汙染，則可以推測該食品中存在著腸道致病菌汙染的可能性，潛伏著食物中毒和流行病的威脅，必須看作對人體健康具有潛在的危險性。
百度百科-大腸菌群