實驗原理 蒽酮能與遊離糖或多糖的糖基、戊糖基和糖反應，反應後溶液呈藍綠色，在620nm處有最大吸收。
三、實驗儀器和試劑
馬鈴薯粉末
可調移液管或吸管
可見分光光度計（723）
電子分析天平
水浴鍋
電爐
蒽酮試劑：取蒽酮2g溶於80%H2SO4中，至80%H2SO4定容。80%H2SO4定容至1000ml，當天配制當天使用。
標準葡萄糖溶液（0.1 毫克/毫升）：將 100mg 葡萄糖溶於蒸餾水中，定容至 1000ml 備用。
四、操作
1.繪制標準曲線
取幹燥、潔凈的試管 7 支，按表 1 的順序加入試劑，進行測定。
以吸光度值為縱坐標，各標準溶液的濃度（毫克/毫升）為橫坐標，繪制標準曲線。
表 1 葡萄糖的蒽酮比色測定--標準曲線的制作
沸水浴中準確煮沸 10min，取出用流動水冷卻，室溫放置 10min，在 620nm 處比色
葡萄糖濃度（mg/ml）
2.測定
樣品溶液：
精密稱取 0.1g 馬鈴薯幹粉於錐形瓶中 -→ 加入 30ml 沸水 -→ 沸水浴 30min（不時搖動） -→ 取出、
3000rpm離心10min（或過濾）--→反復洗滌（或過濾）--→殘渣反復洗滌2次--→合並濾液--→冷卻至室溫--→濃縮至50ml錐形瓶中--→再從中取出1ml，濃縮至10ml容量瓶中
樣品溶液的測定：
(1)取4支試管，按表2加入樣品(加入蒽酮需冰水浴冷卻5min)
表2 糖的蒽酮比色測定--樣品的測定
(2)加入的樣品在沸水中冷卻10min即完成，撤去流動水。冷卻放置 10min，用 620nm 比色測定各試管的 OD 值。
（3）以 1 號試管為歸零管，取 2、3、4 號試管 OD 值的平均值，由標準曲線求出樣品溶液相應的含糖量。
3.結果計算：
C×V
w = ----×100%
m,
式中 w：糖的質量分數（%）
C：標準曲線中糖的質量分數。根據標準曲線求得的糖的質量分數（毫克/毫升）
V：稀釋後樣品的體積（毫升）
m：樣品的質量（毫升）
原理
植物在個體發育的不同時期，代謝活動會發生相應的變化，碳水化合物的代謝也不例外。了解可溶性糖含量的變化具有重要的生理學和實用價值。這裏介紹的是蒽酮比色法，糖在硫酸的作用下生成糖醛，糖醛再與蒽酮作用，形成綠色絡合物，顏色的深淺與糖的含量有關。方法簡單，但沒有氣統壹，因為絕大多數碳水化合物都能與蒽酮反應生成顏色。
儀器和藥品
721 型分光光度計 分析天平
曼特爾 恒溫水浴鍋
燒杯 容量瓶
三角燒瓶 大號試管
吸液漏鬥
乙醚 草酸鈉
飽和醋酸鉛
葡萄糖標準溶液：稱量在 80 ℃ 烘箱中烘烤至恒重的葡萄糖。稱取 100 毫克在 80℃烘箱中烘烤至恒重的葡萄糖，配制成 500 毫升溶液，即每毫升含糖 200 微克的標準溶液。
蒽酮試劑：稱取 1 克純化的蒽酮，溶於 1000 毫升稀硫酸中。硫酸溶液是將 760 毫升濃硫酸（比重 1.84）稀釋成 1000 毫升。
操作步驟
1.可溶性糖的提取
稱取約5g新鮮植物葉片，在乙醚的套管中，仔細研磨成均勻的糊狀，倒入燒杯中，用70℃熱水洗凈套管，將洗凈物並入燒杯中，再加入30-40ml蒸發水，將燒杯置於水浴鍋中加熱，保持溫度70-80℃約半小時，冷卻時滴1滴1滴水。半小時後，冷卻 1 滴 1 滴加入飽和中性醋酸鉛去除蛋白質，直至加入的醋酸鉛不再形成白色沈澱為止。然後將混合液與洗滌後的殘渣壹起倒入 100 毫升容量瓶中，加水至刻度，搖勻。以幹燥漏鬥過濾濾液於幹燥三角燒瓶中，瓶中放少量（約0.2-0.4g）草酸鈉粉末，除去濾液中過量的醋酸鉛，使生成草酸鉛沈澱，再過濾，所得透明濾液即為可溶於糖的浸膏。
2.顯色和比色
吸取上述糖浸膏 1 毫升，放入幹燥潔凈的試管中，加入 5 毫升蒽酮試劑混勻，在沸水浴中煮沸 10 分鐘，取出冷卻，用分光光度計測定，波長為 625 納米，測吸光度。由標準曲線求出濾液中的含糖量（或用線性回歸公式計算），然後計算出樣品中糖的百分比。
3.繪制標準曲線
取葡萄糖標準溶液將其釋放成壹系列不同濃度的溶液，每毫升含糖濃度分別為0、5、10、20、30、40、50、60、70、80、90、100微克。按上述方法分別測定吸光度，然後繪制 A026-糖濃度曲線，或進行線性回歸求出樣品中糖的百分含量。
4.計算樣品中糖的百分比（%）
設 V 為稀釋植物樣品的體積（ml）
C 為提取物的含糖量（μg/ml）
W 為植物組織的鮮重（g）
計算公式如下：%=C×V/(W×1,000,000)×100%