高效去除內毒素親和填料 FF_高效填料

高效去除內毒素親和填料FF

壹、引言

常規方法很難去除生物樣品中的內毒素，有時內毒素會與生物制品結合在壹起，使去除工作變得非常復雜，特別是原核表達產物，內毒素含量有時高達數萬EU/mg，使去除工作更加困難。

去除內毒素的最佳方法是將某些物質與瓊脂糖凝膠偶聯，制成能特異性吸附內毒素的親和填料，這樣它就能特異性吸附內毒素而不損失樣品本身，我們就是這樣做的，將這類物質與高度交聯的瓊脂糖凝膠偶聯，制成高效的去內毒素親和填料 FF。

我們將 USP 級內毒素的類似底物與藥物級親和填料 FF 偶聯。

我們將美國藥典級內毒素類似物與藥用級高度交聯瓊脂糖凝膠偶聯，用於特異性去除病毒、核酸、蛋白質和其它樣品中的內毒素。由於采用了新的偶聯方法，這種填料具有更高的剛性、更強的特異性、更高的負載量、更高的穩定性和更高的樣品回收率。它可以承受 37 攝氏度的高溫 5 天，而性能不會有任何下降。

該產品壹般直接加入樣品中去除樣品中的內毒素，無需加載色譜柱，使用方便，效果顯著，易於推廣。它使用方便、非常有效，而且易於放大。此外，基質在使用過程中不會脫落，安全可靠，可重復使用。包裝特性：特性底物配體配體密度吸附負載量

親和填料粒徑最大流速使用溫度

特異性強，不脫落，樣品回收率高瓊脂糖凝膠內毒素類似底物 4mg /ml

10,000-14,000Eu/ml 平均 50 μm 300cm/h 常溫

pH 值範圍，原位洗滌時 pH 值範圍可達 2-11 儲存溫度℃ 儲存液乙醇

二．應用範圍

去除各種溶液樣品中的內毒素。

III.應用實例

實驗名稱：去除內毒素

實驗步驟：

1、高效去內毒素親和填料FF在過濾器（也可使用G3砂漏鬥）中以1-2倍填料體體積

緩沖液1的體積抽取，再以3-5倍緩沖液1的凝膠體積抽取，再以3-5倍緩沖液1的體積去除內毒素。

2.根據樣品溶液中內毒素的含量，加入壹定量的高效去內毒素親和填充劑 FF

（壹般為壹個樣品填充劑的 1/2 或 1/3），然後在三角燒瓶中 4 ℃、150 rpm 下振蕩 48h。3.對上述樣品進行無菌過濾，測定內毒素含量。

緩沖液 1 成分：1% 脫氧膽酸鈉，20 mM 磷酸鹽緩沖液，pH 7.0。制備：稱取 Na 2HPO 4.12H 2O

2.43g、NaH 2PO 4.2H 2O 0.25g、NaCl 4.5g、脫氧膽酸鈉 5.0g，加註射用水溶解並定容至 500ml

註：上述步驟中所用的玻璃儀器和濾器應在 250℃下幹焙 2h；0.2m 濾膜應在 0.1M NaOH 中浸泡過夜，並在 121℃下高壓滅菌 30min。

如果認為上述方法處理起來很麻煩，而且時間長，可以將填料裝入色譜柱，然後用0.1M NaOH平衡5個床層體積，再用註射用水沖洗30個床層體積，然後上樣，流經上樣容器循環去除內毒素，流速控制在2ml/min，這樣5-8小時內即可去除內毒素。但這種方法不如將填充劑和樣品混合搖勻，原因是有時內毒素會與樣品結合，需要較長時間才能去除。脫氧膽酸鈉溶液在低溫下易發生蛋白腖化，可在 30 度以下的溫度下使用，以避免堵塞色譜柱或漏鬥而不流動。結果：

濃度（毫克/毫升）內毒素（Eu/毫克）

IV.親和填料的使用註意事項：

1、親和填料每次使用前（包括首次使用）都需要用緩沖液 1 處理。2、緩沖液的配制要采用不含內毒素的註射級水，配制過程中要防止內毒素的帶入。3、適當延長填料與樣品溶液之間的處理時間，可增加內毒素的吸附量。4、如果使用磁力攪拌，註意旋轉速度不要太快，以免攪動填料。

5、樣品本身帶負電荷，為提高樣品回收率，可在樣品中加入

7、樣品內毒素過高，超過填充劑處理量時，需稀釋樣品，找出內毒素範圍，與去除內毒素

範圍比較，即可知道去除不徹底的效果，若壹次不行，可重復進行，直至合格。8、親和填料的保存條件為 20%乙醇，+4~8℃。

處理前樣品處理後樣品

2.90 2.90 5000-7000

本產品有嚴格的生產質量控制標準，我們努力為您提供最滿意的產品，最完善的技術支持和服務，歡迎業內朋友交流合作。

我們除了為您提供各種填料規格的高效去內毒素親和填料FF外，還為其提供各種填料、色譜柱等服務，包括：

1、填料和色譜柱的選型及預試

2、開發各種生物大分子的分離純化工藝，幫助您解決分離純化難題 3、幫助您合成色譜特殊要求的填料、可根據客戶要求提供各種填料、各種規格的預裝柱，並與各種純化設備配套使用。5、代理各種進口包裝材料，為客戶提供最專業的售前售後服務。