(1)根據圖4中的目的基因,最終產生乙肝病毒外殼用於接種,說明目的基因的具體功能是指導乙肝病毒蛋白的合成;
(2)這個問題很簡單,但是學生很容易忽略,容易出錯。不清楚PCR叫聚合酶鏈反應。但重組質粒時需要切割質粒,將目的基因與質粒連接,因此需要限制酶和DNA連接酶;
(3)本課題主要考察失活的特征。失活主要是破壞核酸的結構,使其失活。血源性“乙肝疫苗”是取乙肝病毒感染者的血液,通過高速離心將血液中的乙肝病毒純化,然後滅活。某些乙肝病毒在滅活核酸後可能仍有活性,這將導致乙肝病毒在接種者體內繁殖和發病。
(4)本課題主要考察遺傳密碼的特點。所有的生物都使用壹套遺傳密碼,而* * *有64個密碼子,所以目的基因可以在人體細胞和大腸桿菌中產生相同的抗原;
(5)本課題主要考察限制性內切酶切割後形成的粘性末端的特征,這是壹個難點。BamHⅰⅰ獲得目的基因,切割質粒時,目的基因和質粒兩端會產生相同的粘性末端,但會出現目的基因自環化、目的基因自連接、質粒自連接、目的基因和質粒在連接酶作用下連接等多種情況,需要進行篩選。用兩種限制性內切酶切割時,質粒和目的基因兩端不會形成相同的粘性末端,在連接酶的作用下不會發生環化,也可以防止反向連接。最後,在連接酶的作用下,只有目的基因和質粒會重組成功,質粒不會重組。
(6)在這個問題中,獲得重組質粒時,四環素抗性基因不會被切割。根據圖2,BamHⅰI可以切割破壞四環素抗性基因,所以在第五個問題中,可以保持四環素抗性基因完整的質粒要用Hind和EcoRⅰI切割,這樣重組成功的質粒和沒有重組的質粒最終會保持四環素抗性基因的完整。根據題幹,只能是重組質粒。
(7)本課題主要研究篩選含有目的基因的受體細胞的方法。根據原理,將重組質粒上的抗性基因接種到受體細胞上,看其能否存活,存活的含有重組質粒,即含有目的基因。
所以答案是:
(1)蛋白殼;
(1)指導乙肝病毒外殼的合成;
(2)聚合酶鏈反應技術DNA連接酶;
(3)血源性疫苗需要滅活,破壞其核酸結構,滅活不成功會導致接種者乙肝,但基因工程不需要;
(4)所有生物都使用壹套遺傳密碼;
(5)BamHⅰ或Hind和EcoR:第二組限制性內切酶效率高,第壹組只用壹種限制性內切酶,會導致目的基因和質粒兩端粘端相同。進行重組質粒時會有五種結果:質粒連接質粒,質粒連接目的基因,目的基因連接目的基因,目的基因自環化,質粒自環化,需要篩選,比較麻煩;兩種酶切兩端產生的粘端不壹致,可以避免第壹組的情況;
(6)1;
(7)將大腸桿菌轉移到含有卡那黴素培養基中培養,含有目的基因的大腸桿菌能夠存活。