青黴素由肌內註射或靜脈滴註給藥。1．成人：肌內註射，壹日80萬～200萬單位，分3～4次給藥；靜脈滴註：壹日200萬～2000萬單位，分2～4次給藥。2．小兒：肌內註射，按體重2.5萬單位/kg，每12小時給藥1次；靜脈滴註：每日按體重5萬～20萬單位/kg，分2～4次給藥。3．新生兒(足月產)：每次按體重5萬單位/kg，肌內註射或靜脈滴註給藥；出生第壹周每12小時1次，壹周以上者每8小時1次，嚴重感染每6小時1次。4．早產兒：每次按體重3萬單位/kg，出生第壹周每12小時1次，2～4周者每8小時1次；以後每6小時1次。5．腎功能減退患者：輕、中度腎功能損害者使用常規劑量不需減量，嚴重腎功能損害者應延長給藥間隔或調整劑量。當內生肌酐清除率為10～50ml/分時，給藥間期自8小時延長至8～12小時或給藥間期不變、劑量減少25%；內生肌酐清除率小於10ml/分時，給藥間期延長至12～18小時或每次劑量減至正常劑量的25%～50%而給藥間期不變。6．肌內註射時，每50萬單位青黴素鉀溶解於1ml滅菌註射用水，超過50萬單位則需加滅菌註射用水2ml，不應以氯化鈉註射液為溶劑；靜脈滴註時給藥速度不能超過每分鐘50萬單位，以免發生中樞神經系統毒性反應。