我只能簡單介紹壹下妳問的三個涉及面比較廣的問題。
1.培養基是微生物生長和繁殖的物質和環境基礎。培養基含有氮源、碳源、水、生長因子等。可分為固體培養基、液體培養基、天然培養基、合成培養基、選擇性培養基等。不同的培養基有不同的作用，有的用於活化微生物，有的用於選擇微生物，有的用於保存微生物。根據具體目的和微生物的種類，選擇不同的培養基。此外，所選培養基中使用的營養物比例取決於具體需要。至於保存方法，有短期保存和長期冷凍保存，保存方法很多。妳說的臨時保存就是4攝氏度傾斜試管保存法，在傾斜試管培養基上標記微生物，然後4攝氏度保存。妳需要培養基。還有幾種不同的甘油保存方法。有的是無菌水+細菌和甘油按不同比例混合形成濃度為65，438+00% ~ 40%的甘油保存液，有的是培養基(液體培養基)+細菌和甘油按比例混合形成濃度為65，438+00% ~ 40%的甘油保存液，然後在-20攝氏度冷凍。保存期壹般是幾年。所以，培養基也是需要的。這只是眾多媒體中的壹小部分。先說到第壹個問題。
2、有點暈，第二個問題比較復雜。妳說的稀釋塗布平板法主要用於細菌的分離純化。當菌懸液濃度過高時，接種到培養基中會出現密集的菌落，菌落相互重疊，失去分離純化的意義。如果菌懸液濃度太低，妳塗在平板上的菌懸液裏可能沒有妳需要的細菌。也不可能分離出目標細菌。
什麽濃度適合妳說壹步壹個腳印？妳不知道，所以妳只能用10倍，1000倍，10000倍稀釋，然後用每個濃度的菌懸液塗在相應的平板上，這樣才能保證會有壹個合適的濃度，妳想要的細菌能夠被分離純化。當然，如果壹次性適當稀釋，也是可以的，如果能隔離出純單菌落也沒人敢否定妳，但是成功率不高，或者說比較難。這個方法也挺麻煩的，但是稀釋也是壹個很簡單的操作。不知道妳能不能理解這個？
3.第三個問題稍微好描述壹點。原理:純凈水在-20攝氏度會形成冰晶，破壞細胞壁和細胞膜，殺死細菌。甘油不會形成冰晶，但可以維持細胞壁和細胞膜的完整性。同時，由於100%甘油不能混菌均勻，而且太粘，不流動，所以要稀釋成10%-40%甘油，我們實驗室壹般用20%甘油終濃度進行保種。註意最終濃度是20%，不是20%。如果濃度低於15%或10%，也會有冰晶，破壞細胞壁和細胞膜。另壹方面，細菌畢竟是細菌，不是高等生物。他們對逆境有很強的抵抗力。-20攝氏度不會殺死它們，只會抑制它們的活動，所以它們停止生長，進入類似休眠的狀態，但當條件合適時，它們會繼續繁殖。當然，甘油-20攝氏度低溫保存的菌種，使用前要進行活化處理。註意，這是我前面提到的激活介質。它是壹個有營養的環境，它的目的是喚醒休眠的細菌，恢復它們的活力。這從另壹方面回答了妳關於使用培養基的問題。還有活化細菌的作用。別說——20攝氏度都殺不死細菌。有些細菌能在100攝氏度下生存。當然，這樣的細菌是極端微生物。
說了這麽多，不知道妳有沒有認真看，有沒有理解。別讓我費那麽大勁打那麽多字，看壹眼就好。~ ~ ~ ~而且如果妳看懂了，希望妳能分享給我。最近問了壹些關於基因克隆的問題，用了很多，所以現在在掙分。。。謝謝妳。