國內學者對SP-4培養基進行了改進。趙繼文等[4]利用改良的SP-4培養基成功地從性病和性亂人群中分離出Mg。初期生長時間在30天以上，平均37.83天，最長55天。
1.2組織細胞培養法可為支原體提供良好的類似體內的生長環境。早在20世紀60年代，Chanock等人[5]就報道了肺炎支原體(Mp)在組織和細胞中的生長。20世紀90年代，Jensen等人[3，6]開始嘗試用細胞培養的方法增殖Mg，並在電鏡下觀察Mg侵入細胞的過程及其在細胞中的定位。在PCR的監控下，Jensec發現在11 PCR檢測出MgDNA陽性的尿道樣本中，有9個樣本適應在Vero細胞磁頭中增殖，經過多次傳代後，轉移到改良的Friis fF肉湯培養基中，有6個樣本可以繼續傳代，最後在瓊脂培養基中克隆出4個菌株。Jensen認為，細胞培養和繁殖的過程在分離和獲得新的Mg菌株方面發揮了三種作用。壹是使臨床標本中的Mg逐漸適應在人工培養基中生長，二是增加支原體肉湯培養基中接種的支原體數量，三是提供持續的接種源。根據Mg的免疫學特性，建立了檢測Mg抗體和檢測鑒定Mg抗原的血清學方法。
Furr等[7]在1984中詳細報道了檢測Mg抗體的MIF技術。Moller等利用MIF對31的急性盆腔炎患者進行Mg抗體檢測，發現其中約40%的患者在發病後壹個月內抗體滴度發生4次及以上的變化。Taylor-Robinson等[9]報道間接MIF試驗是檢測NGU患者Mg抗體的敏感、特異和簡單的方法。Jensen等用EIA檢測有尿道炎癥和無尿道炎癥狀的男性性病患者急性血樣中的Mg抗體，發現反應性較弱，與Mp有廣泛的交叉反應。
根據特異性抗體能阻止支原體生長代謝的特點，我們可以用已知的高價血進行祖先生長代謝抑制試驗來鑒定支原體[11]。趙繼文等人用MIT對分離的Mg株進行了鑒定。
支原體表面暴露的脂質相關膜蛋白(LAMPs)是種屬特異性抗原，抗原性高，不同株支原體的LAMP抗體具有高度的種屬特異性，與其他種屬無交叉反應[12，13]。)因此，提取Mg的LAMp建立了檢測Mg抗體的ELISA方法，可以消除Mg與Mp的交叉反應。DNA探針法和聚合酶鏈反應(PCR)法檢測Mg克服了前兩種檢測方法的缺點，為研究Mg與疾病病因的關系提供了有力的手段。
3.1DNA探針技術1987 Hyman[14]用PUCB載體構建Mg基因文庫，從中篩選特異性DNA探針。通過斑點雜交，可以檢測出僅含0.1ng的特異性支原體DNA，即105CFU。
3.2聚合酶鏈反應(PCR)技術PCR是壹種靈敏度高、特異性強、快速、簡便的新型基因診斷技術。從65438到0990，PCR技術開始應用於醫學分支領域。
早期的引物是參照細菌末端特異性粘附蛋白的DNA序列設計的。Palmer等在體外擴增了Mg粘附蛋白的部分核苷酸序列，3株Mg均出現37bp的DNA片段，證明PCR技術可以檢測到10-15g的mg-DNA，其引物序列為:
mg 1:5 ' TGT CTA TGACCA GTA TGT AC3 '
Mg2:5“CTG CTT TGG TCA AGA CAT CA3”
1991年Jensen等人【16】根據Mg的粘附蛋白基因設計合成了以下幾組引物:
mgPa-1 5 ' AGA TGA TGA AAC CCT AAC CCC TTG G3 '
mgPa-1 5'GAC卡特彼勒CAA GGT ATT TCT CAA CAG C3 '
mgPa-1 5 ' CCG AGG GGT TTT CCA TTT TTG C3 '
MgPa-1和MgPa-3成功擴增出Mg的281bpDNA片段，5個臨床分離株擴增出相同的DNA片段，其他支原體和細菌均為陰性。以MgPa-2為探針，Southern eP印跡雜交擴增產物均為陽性，證明引物具有特異性，對* * *的檢測減少了約50 Mg細胞。1993 Jensen等人[17]根據Mg粘膜蛋白基因設計了另壹對引物，即:
針對mg粘附蛋白基因設計了另壹對引物，即:
mgPa-476:5 ' ATG GCG AGC CTA TCT TTG ATC CTT TAA 3 '
mgPa-903:5 ' TTC ACC TCC CCA CTA CTG TCC TAA tgc 3 '
用於確認和補充引物MgPa-1和MgPa-3擴增的結果，擴增片段為453bp。發現這兩對Mg粘附蛋白引物的敏感性完全相同。用此法檢測99例尿道炎患者的尿拭子，結果17例Mg陽性，而培養法無壹例陽性。
1994 Jensen[18]擴增Mg粘附蛋白的基因序列並測序。結果表明，Mg條件下的序列具有明顯的異質性。因此，根據16SrRNA的基因序列，Jensen等學者設計了特異性PCR引物，以便檢測臨床樣本中所有Mg的感染。
mg-1.5 ' GAA TGA CTC TAG CAG GCA ATG GCT G3 '
Mg-2，5 ' ATT TGC TGC TCA CTT TTA CAA GTT ggct 3 '
四份臨床標本的實驗結果表明，Mg粘附蛋白基因序列不同，但其165rRN基因序列100%同源。將兩種引物組合進行PCR，在可疑陽性標本中可檢出Mg基因小於10-50拷貝的Mg基因，即保證了以16SrRNA基因為靶基因的PCR體系。
趙繼文等[19]用Palmer設計的引物擴增mg37bpDNA片段，在三個群體中檢測到mg。結果顯示，濫交人群陽性率為25.26%，性病人群陽性率為65438±02.33%，健康人群陽性率為3.85%。孔等[20]用Jensen設計的MgPa-1和MgPa-3擴增Mg281bpDNA片段。檢測結果顯示，性亂婦女中Mg檢出率為65438±00.2%，性病患者中Mg檢出率為4.0%。
在1998中，米黃祖等[2]報道了兩種分別基於Mg粘附蛋白和16rRNA基因的巢式PCR檢測技術。前者擴增出原Mg的374bpDNA片段，後者擴增出241bpDNA片段。巢式PCR不僅提高了靈敏度，而且由於使用了兩對不同的引物，進壹步提高了特性。用這些方法檢測40例女性性病患者，檢出12例Mg陽性，陽性率為30%，高於普通PCR。微生物感染診斷的“金標準”是培養法，但Mg培養成功率極低，需要進壹步研究和改進，以促進Mg在其中生長。此外，在Mg的培養中引入細胞系可能是壹種很好的方法，因此有必要加強這方面的探索和研究。由於支原體物種之間的交叉反應以及抗原和抗體的高純度，免疫學檢測方法在實際應用中受到限制。研究並建立壹種快速、靈敏、特異的檢測臨床標本中Mg抗原的方法具有重要的實用價值。PCR是壹種簡單、直接的檢測Mg的方法，正在被廣泛應用。主要用於Mg感染或急性感染的早期診斷和各種人群Mg的流行病學研究。但需要註意的是:①臨床樣本中Mg含量低、DNA純度不夠、抑制劑過多、TaqDNA聚合酶活性低都會造成假陰性，模板DNA的提取技術有待進壹步完善；②由於PCR的高靈敏度，在整個操作過程中應嚴格避免PCR產物的汙染，以減少假陽性。