問題描述:
在高等植物染色體姬姆薩顯帶法中，α-溴萘需要處理3小時。這壹步的目的是什麽？α-溴萘起什麽作用？
最好說明壹下答案的來源。
分析:
α-溴萘
65438+鄰溴萘
C10H7Br
它用於測定折光率、合成染料和有機化合物，也用作幹物質的傳熱介質。
在生物實驗中用於阻斷細胞分裂。效果和秋水仙堿差不多。
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2.預處理:目的:獲得中期分裂相較多的細胞，縮短和分散染色體，便於壓片觀察。
預處理機制:阻止或破壞紡錘體微管的形成，使有絲分裂過程在中期受到抑制，從而在中期積累更多的有絲分裂相；導致chr的高度濃縮和縮短，有利於chr的分散。
方法1:冷凍處理。
將根尖放入裝有蒸餾水的指管中，放入裝有冰水的冰瓶中，然後將冰瓶放入0-3℃的冰箱中24小時。染色體較多的實驗材料可以延長20-40小時，但要註意不要冷凍材料。
方法2:化學處理
A.0.01-0.2%秋水仙堿溶液2-4小時。
b .將對二氯苯飽和水溶液處理3-4小時。
c .向100ml對二氯苯飽和水溶液中加入1-2滴α-溴萘，反應3-4小時。
d、0.002 M8-羥基喹啉處理3-4h。
溫度不能太高，10-15℃為宜。
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(6)植物細胞有絲分裂
壹、實驗目的
(1)學習並掌握植物根尖細胞壓片技術。
(2)觀察植物細胞有絲分裂過程中染色體的形態特征和動態變化。
二、實驗原理
有絲分裂是植物細胞增殖的主要方式。在有絲分裂過程中，細胞核中的染色體可以被精確復制並有規律地分布到兩個子細胞中，使子細胞的遺傳組成與母細胞完全相同。因此可以推斷，生物性狀的遺傳與染色體的精確繁殖和均勻分布有關，支配生物性狀的遺傳物質主要存在於細胞核內的染色體中。
高等植物中的有絲分裂主要發生在根尖、莖生長點和幼葉的分生組織中，根尖容易獲得，易於操作和鑒定。通過對根尖進行固定、染色和壓片，在顯微鏡下可以觀察到大量處於有絲分裂各階段的細胞和染色體，看到染色體的變化特征和形態特征，從而對染色體進行計數。為了獲得更多的中期染色體圖像，可采用藥物處理或冷凍處理，防止紡錘體的形成，使細胞分裂停止在中期，染色體變短，易於分散，便於觀察和研究。另外，通過酸水解或酸處理細胞組織，去除細胞間的果膠層，使細胞軟化，便於細胞相互分離，有利於壓片和染色。
三、實驗材料
小麥(小麥種)、玉米(Zemays)、大蒜(Aillumsativum)、洋蔥(Aillum cepa)、蠶豆等。
四、實驗儀器和藥物
1.家電冰箱、培養箱、顯微鏡、水浴鍋、分析天平、扭秤、電爐、溫度計、剪刀、鑷子、刀片、量筒、量杯、三角瓶、燒杯、漏鬥、培養皿、酒精燈、滴瓶、載玻片、蓋玻片、濾紙、標簽、膠水等。
2.藥物無水酒精、95%酒精、70%酒精、45%酒精、0.5%醋酸品紅、0.5%蘇木精* *、4%鐵礬溶液、苯酚、亞硫酸、二甲苯、秋水仙堿、對二氯苯、8-羥基喹啉、α-溴萘、1mol/L鹽酸等。
動詞 （verb的縮寫）實驗步驟
1.文化
(1)大蒜和洋蔥根尖:將大蒜或洋蔥放在盛有清水的小燒杯口上，使根部與水接觸，然後轉移到25 -28℃培養。當根尖長到2cm左右時，在上午9-10切下根尖備用。
(2)玉米或小麥、蠶豆根尖:將蠶豆種子用溫水浸泡2天，浸泡65、438+0天，待水膨脹後，轉移到蓋有幾層吸水紙的培養皿或池盤中，蓋上雙層濕紗布並加少許水，在25 -28℃培養。當根尖長到2cm左右時，在上午9點10分或下午3-5點摘下。
2.預處理為了便於有絲分裂中染色體的觀察和計數，切下的根尖在固定前要進行預處理，可以改變細胞質的粘度，抑制和破壞紡錘體絲的形成，促進染色體的縮短和分散。預處理方法包括低溫預處理和藥物預處理。
(1)低溫預處理:將切下的根尖浸入盛有蒸餾水的燒杯中，置於4℃冰箱中24小時。這種方法效果很好。不損傷染色體，染色體縮短均勻，操作簡單易行，適用於各種作物。
(2)藥物預處理:常用藥物有秋水仙堿溶液、對二氯苯溶液、8-羥基喹啉。
3.固著可以借助物理方法或化學藥物快速滲透到組織和細胞中殺死它們，從而在生活中盡可能完整真實地保持它們的形態結構和內容。固定時，用蒸餾水沖洗預處理後的根尖兩次(約5分鐘)。然後移入卡諾固定液中，在4-15℃固定20-24小時，再用70%酒精沖洗兩次，轉入70%酒精中。在4℃的冰箱裏保存不超過兩個月。保存時間較長的材料可在觀察前再次用固定液處理。或將預處理後的根尖放入0.075mol/L KCI溶液中20分鐘，然後用蒸餾水沖洗2-3次(約10分鐘)備用。
4.解離分解分生組織細胞間的果膠，軟化或部分分解細胞壁，使細胞和染色體易於分散扁平。有兩種解離方法:酸解和酶解:
(1)酸解:將根尖從固定液中取出，用蒸餾水沖洗。然後將其放入60℃水浴中預熱的1 mol/L鹽酸中，在60℃解離10-15分鐘。待根尖清晰呈米黃色時，取出用蒸餾水沖洗2-0分鐘。
(2)酶解:將根尖從固定液中取出，在0.1 mol/L乙酸鈉中漂洗，用刀片切去根冠和延伸區(蠶豆根尖粗，可以將分生組織切成2-3片)，將根尖分生組織放入乙酸鈉配制的2.5%纖維素酶和果膠酶的等量混合液中。在25-28℃下處理4小時。此時組織已經被酶液浸透呈淺棕色，質地柔軟，仍可用鑷子夾起。用滴管吸起酶液，然後滴加0.1 mol/L乙酸鈉，使組織中的酶液逐漸滲出，再加入45%乙酸。
5.低滲處理後，用蒸餾水沖洗遊離的根尖2-3次(約10分鐘)。酶解後的根尖在蒸餾水中浸泡10-15分鐘，然後清洗2-3次。壹定要沖洗幹凈，否則會影響染色。低滲處理後的根尖放入70%酒精備用。
6.染色和壓片
(1)醋酸品紅染色制作:取壹個處理過的根尖放在載玻片中間，用吸水紙吸去多余的保存液，用刀片將根尖分生組織切成1:切成薄片，加入壹小滴醋酸品紅染料。大約5分鐘後，加入蓋玻片。將吸水紙放在蓋玻片上，用左手握住載玻片，用右手拇指對準頂端部分，在吸水紙上施加壓力。或者用鉛筆的橡皮頭輕敲蓋玻片，使材料分散均勻，細胞分離變平。壓力要合適，註意不要移動蓋子。為了增強染色效果，可以在酒精燈上稍微加熱載玻片，但不會沸騰。以避免染料沈澱。加熱的作用不僅可以軟化物質，使其易於著色，還可以破壞部分細胞質，使細胞核和染色體具有清爽的背景。如果全細胞輕度染色，可沿蓋的壹側滴少許染色液，使其慢慢滲透。放置壹段時間後加熱，重復染色。
品紅醋酸酯常用於染色體的臨時制作，著色性不強，分色效果不是很好，不適合永久制作。
(2)醋酸地衣紅染色的產生:因為地衣紅易溶於酒精。因此，材料從保存液中取出後，應充分清洗，然後浸入45%的醋酸中進行染色。染色時，將材料放入小試管中，加入含鹽酸的2%地衣紅浸泡材料，在酒精燈上加熱2-3秒，靜置約半小時或更長時間，取出後放在載玻片上，加入壹滴不含鹽酸的L%地衣紅醋酸酯染色液。如醋酸品紅法。地衣紅染色液的著色力比洋紅更強，染色更深，特別是對根尖等體細胞染色體。
(3)鐵氧體-蘇木精染色法:這是根尖細胞有絲分裂染色體計數中使用的最佳方法，可將各種植物的染色體染成顏色較深，分色清晰，照相效果好，有利於標本的長期保存。
將解離清洗後的材料放入4%鐵礬水溶液中染色2-4小時，加熱(30-40℃)媒染可縮短至0.5-1小時。用水沖洗4-5次，每次5分鐘左右。壹定要把殘留的黃鉀鐵礬洗幹凈。然後在5%蘇木精水溶液中染色2-4小時。如果染色時發現染液渾濁，說明明礬沒有洗幹凈，需要在蘇木染色前再次用水清洗。用水沖洗染色材料約5-10分鐘，然後在壓片前將其移入45%乙酸中進行顏色分離和軟化10-20分鐘。壓片時，用鑷子取根尖放在載玻片上，切掉根尖的分生組織。切成薄片，滴壹小滴45%的醋酸，迅速搗碎根尖，加蓋玻片，壓片。具體方法同醋酸品紅法。
媒染要充分，媒染後要徹底洗凈。在此基礎上，蘇木精染色也要充分，醋酸分色軟化要適當，使染色體變成深藍色，細胞質褪色。
7.環境壓力好的薄膜在低倍顯微鏡下觀察，可以觀察到有絲分裂不同階段的染色體。選取不同分裂階段的典型細胞，高倍鏡下觀察，註意細胞核、染色體和紡錘體的變化。
第八步:準備永久性藥片
六、實驗工作
(1)制作1壹兩張合格的有絲分裂玻片，交1-2永久玻片，註明有絲分裂期和染色方法。
{2}畫出2-4張有絲分裂期的圖表。