wb電泳不在壹條線上的原因：
1、樣本本身含有高鹽。
2、積層膠長度不足，壹般樣品1-2cm足矣。但是如果樣本含有高鹽可以考慮將積層膠加長到4cm左右。
3、緩沖液需要更換。使用多次的Buffer緩沖能力會大打折扣，如果樣品珍貴難得推薦用新鮮配制電泳緩沖液，反之用3次就丟棄。
4、上樣量有關。
5、電壓不要太高，壹般60-80V跑完積層膠後再將電壓提高。如果感覺不放心就低壓4度電泳，效果還可以。
6、確保分離膠底部的氣泡排光，如果有氣泡將會影響電泳。
wb電泳註意事項
1、聚丙烯酰胺的30%母液會降解，要4度避光保存。
2、APS會失效，10%APS壹般保質期才壹個月左右。-20度分裝長期保存。
3、註意Trisbuff的PH值，以及平時所用的水的PH值。PH值改變會使帶型非常怪異，所有蛋白和溴酚藍壓成壹條細線（即便在分離膠中），如果溴酚藍前有紅色染料，那麽此染料彗星式拖尾從溴酚藍壹直延伸到膠底部（溴酚藍此時湧動極緩慢，位於膠中上部）。
4、上下層式電泳裝置若漏液，哪邊漏液，電泳條帶往哪邊傾斜。內外式電泳裝置漏液，則裝置處於短路狀態，液體會過熱。SDS-PAGE膠可能局部自溶，條帶扭曲、變形。
5、配膠用玻璃板和邊條應及時洗凈。玻板未洗凈的壞處很多。盡管玻璃看似平滑，但是壹些細微的凹陷處會凝結肉眼無法分辨的膠顆粒（摸上去疙疙瘩瘩），其壞處是，在該部位極易導致不均勻的膠塊，樣品經過該處或電泳散熱不好，條帶變形。
如果是RNA的超薄膠，膠板的顆粒會導致局部巨大氣泡，非常難於清除；蛋白膠也會導致壹些小氣泡的產生。玻板沒洗凈的另壹個壞處是，由中學物理知識可知，玻璃表面越光滑粘附越牢，未洗凈的玻板會削弱和膠體間的粘附力，拔梳子或邊條時會產生微小的錯動，膠體下部出現大量氣泡（夾在玻板和膠之間，這個關系不大）。
嚴重的錯動會使上樣時，樣品從膠和玻璃之間的間隙漏光，或者甚至膠和玻板分開。為避免拔梳子時的錯動，可在電泳緩沖液中拔梳子（比水更好，有SDS潤滑）。
判斷玻板是否洗幹凈，用手摸壹下有沒有疙疙瘩瘩的；最好用洗潔精之類，洗衣粉、肥皂都不好用。
6、上樣時，不要把tip深入膠孔過深（或者采用細的尖端拉長的專用上樣槍頭），可能會錯開膠和玻板，樣品會泄露。