wb實驗原理如下：
WB實驗是通過聚丙烯酰胺凝膠電泳（PAGE）將混合蛋白質樣品分離後，利用特殊虹吸或電場裝置印跡至固相介質（例如PVDF膜）上，再以固相載體上的蛋白質或多肽作為抗原。
與相對應的第壹抗體特異性結合，之後再與酶或同位素標記的第二抗體相結合，最終通過底物顯色或放射自顯影來檢測特異性目的基因表達的蛋白成分。
蛋白質樣品制備
原始樣品可為細胞、組織、培養上清、免疫沈澱或親和純化的蛋白，以下為定性檢測目的蛋白時細胞樣品的處理方法，其余的樣品制備方法參閱相關文獻。
1.培養細胞或藥物處理。
2.棄培養基，用1XPBS漂洗細胞2次，去盡殘留培養基。
3.加入1XSDS樣品緩沖液，刮落細胞，轉移到Ep管。註意：冰上操作。
4.超聲10~15秒剪切DNA以減低樣品粘性。
5.煮沸樣品5min。
6.離心12000g，5min，取上清。
SDS-PAGE電泳
壹、清洗玻璃板
二、灌膠與上樣
1.玻璃板對齊後放入夾中卡緊。然後垂直卡在架子上準備灌膠。
2.配10％分離膠，加入TEMED後立即搖勻即可灌膠。灌膠時，可用10ml槍吸取5ml膠沿玻璃放出，待膠面升到綠帶中間線高度時即可。然後膠上加壹層水，液封後的膠凝的更快。
3.當水和膠之間有壹條折射線時，說明膠已凝了。再等3min使膠充分凝固就可倒去膠上層水並用吸水紙將水吸幹。
4.配4％的濃縮膠,加入TEMED後立即搖勻即可灌膠。將剩余空間灌滿濃縮膠然後將梳子插入濃縮膠中。待到濃縮膠凝固後，兩手分別捏住梳子的兩邊豎直向上輕輕將其拔出。
5.用水沖洗壹下濃縮膠，將其放入電泳槽中。
6.在電泳槽的上、下槽中加入1×Tris-甘氨酸或SDS電泳緩沖液，上樣。
7.連接電泳槽到電泳儀。上槽接負極,下槽接正極，通電起始電壓70～80V，10min後100V，電泳2h或當溴酚藍遷移至離底部1cm時，停止電泳。
轉膜
1.將膠浸於轉移緩沖液中平衡10min。註意：若檢測小分子蛋白，可省略此步，因小分子蛋白容易擴散出膠。
2.依據膠的大小剪取膜和濾紙6片，放入轉移緩沖液中平衡10min。如用PVDF膜需用純甲醇浸泡飽和3-5秒鐘。
3.裝配轉移三明治:海綿3層濾紙膠膜，3層濾紙海綿，每層放好後，用試管趕去氣泡。切記:膠放於負極面(黑色面)。
4.將轉移槽置於冰浴中，放入三明治(黑色面對黑色面)，加轉移緩沖液，插上電極，100V，1h(電流約為0.3A)。
5.轉膜結束後，切斷電源，取出雜交膜。