保存和使用：粉末狀的 FLUO-3AM 應在零下 20 度以上保存。建議使用二甲基亞碸作為溶劑。在溶解前，FLUO-3AM 和 DMSO 都應達到室溫。溶解過程可能比較緩慢。溶解在無水二甲基亞碸中的FLUO-3AM如需長期保存，應密封並保存在零下20度的環境中。使用前，應使保存液達到室溫後再打開。可避免 AM 探針在長期儲存過程中發生水解。1.工藝概述
Fluo-3 AM 通常以 5 μM 的濃度用於細胞內鈣離子檢測。熒光探針負載通常是將細胞與含有 5 μM Fluo-3 AM 的適當溶液在 37 攝氏度下孵育 30-60 分鐘，然後進行適當的水洗，水洗後可考慮再適當孵育 20-30 分鐘，以確保細胞中的 Fluo-3 AM 完全轉化為 Fluo-3。
2.Fluo-3AM溶液的配置
100ug的Fluo-3AM分子量為1219.9，換算成實際摩爾濃度後溶於無水二甲基亞碸。通常配置為 1~5mM DMSO 儲存液。如果出現難以溶解的情況，可以用20% F127的二甲基亞碸溶液輔助溶解。
四、註意事項：
1、熒光染料有淬滅問題，存放時應盡量避光；
2、實驗過程中註意個人防護，戴手套、口罩；
五、應用舉例
2、貯存液的配制（5000μM/L）
根據說明書，計算0.1mg為0.089μM，則需加入DMSO18uL，微量進樣器反復吹打混勻後分裝，按說明書要求避光-20度冷凍保存。
（二）應用
每毫升細胞懸液加入1uL，Fluo-3AM的終濃度為5μM/L
Hoechst 33258染色液
固定液50ml
Hoechst 33258染色液50ml
防熒光淬滅封閉液5ml
說明書1份
保存條件：
Hoechst33258染色液需在4℃避光保存。本試劑盒自訂購之日起六個月內有效。
註意：
Ø 需要熒光顯微鏡或激光***聚焦顯微鏡。
Ø 需要 PBS 或 0.9% NaCl 溶液。
Ø 需要蓋玻片和載玻片。
Ø 熒光物質易被淬滅，染色樣品應避光保存。
Ø；使用防淬火密封劑可減輕淬火，但仍建議盡量避光。