測定細菌量常用的單位有:
μm
菌落總數檢測片檢測法
方法編號:5011
1 適用範圍:可用於測定各類食品和原材料中的菌落總數。也可用於食品接觸容器、操作臺和其他設備表面的衛生檢測。
2方法原理:將營養培養基、凝膠和氯化三苯基四唑(TTC)顯色劑等裝入試紙片中,加樣培養後,細菌菌落在試紙片上呈現紅色斑塊,通過計數報告結果。
3 方法
3.1 樣品處理:無菌稱取樣品 25g(或 25mL)放入盛有 225mL 無菌生理鹽水的取樣瓶或勻漿杯中,充分振蕩(勻漿)後稀釋成 1:10。用 1 毫升滅菌吸管吸取 1 毫升 1:10 稀釋液,註入裝有 9 毫升滅菌生理鹽水的試管中,再用 1 毫升滅菌吸管反復吸吹,制成 1:100 稀釋液。以此類推,進行 1:1000 的稀釋,每次稀釋都要更換滅菌移液管。
3.2接種:壹般食品選用2~3倍稀釋液進行檢測,含菌較少的液體樣品(如食用純凈水和礦泉水等)可直接用原液檢測。將試片放在水平桌面上,揭開上面的透明薄膜,用滅菌吸管吸取樣品原液或稀釋液 1mL,均勻加入中間的紙片上,輕輕放下上面的蓋膜,靜置 5min,使培養基凝固。每次稀釋接種兩片。
3.3 培養:將試片疊放在壹起,放回原自封袋中,水平放置於恒溫培養箱中,透明面朝上,疊放片數不超過 12 片。培養溫度為 36℃±1℃,時間為 15~24 小時。
4 結果判斷與計數:
4.1 細菌在紙片上生長時會出現紅色斑點,選擇菌落數適中(10~100 個)的紙片進行計數,然後乘以稀釋倍數,得出每克(或毫升)樣品所含細菌菌落總數。菌落數小於 100 時,按實際數報告。大於 100 時,用兩個有效數字表示,兩個有效數字後的數字采用四舍五入法,並以指數 10 表示。
4.2計數原則及上報方法
4.2.1通常選擇菌落數在10~100個之間的紙片進行計數,乘以稀釋倍數上報(見下表中倍數1的示例)。國家標準菌落計數報告方法稱cfu/g或mL,cfu指菌落形成單位。
4.2.2若有兩個稀釋度的菌落數在10~100之間,兩者之比小於2,則取平均值,若大於2,則用較小的稀釋度上報(見下表中的例2和例3)。
4.2.3 如果三個稀釋度的菌落數都在 10 到 100 之間,則取兩個較低值的平均值(見下表例 4)。
4.2.4 如果三個稀釋度的菌落數都小於 10 或大於 100,則應使用較低或較高的稀釋度重新檢測菌落數;應使用小於定量標準的最小值或大於定量標準的最大值(見下表中的例 5 和例 6)。
示例
稀釋
兩個稀釋的比率
選擇計數
稀釋
報告方法
(個/克或
個/毫升)
10-1
10-2
10-3
1
2
3
4
5
6
158
208
265
98
8
295
76
68
82
50
5
174
5
12
50
15
1
106
-
1.8
6.1
-
-
-
10-2
10-2, 10-3
10-2
10-1, 10-2
10-1
10-3< /p>
7.6×103
9.4×103
8.2×103
3.0×103
8.0×10
1.1×105
5 表面取樣方法:在試片上加 1mL 滅菌生理鹽水,靜置 1h 以上,使培養基凝固;掀起上層濾膜,使濾紙中部貼於待測物表面,用手在外側輕輕按壓;然後蓋上上層濾膜,放入培養箱中培養。
6 註意:用過的紙上有活菌,應按生物安全廢物處理原則處理。
菌落數少時的情況 菌落數多時的情況