來源作者:中國水產養殖網
壹.傳染性胰腺壞死(IPN)
1，病原體
傳染性胰腺壞死病毒(IPNV)、多多斯和其他人認為IPNV是壹種雙RNA病毒。病毒顆粒為二十面體，無包膜，有92個直徑約50 ~ 75 nm的衣殼。衣殼包含由兩個片段組成的1雙鏈RNA基因。它是已知魚類病毒中最小的韻RNA病毒。在氯化銫中，病毒的浮力密度為1.33 g/ml，沈降系數為0。435S，病毒顆粒的分子量為55×10s道爾頓，所有衣殼蛋白的重量為50.2×106道爾頓；RNA為4.8×106美元，占病毒顆粒重量的8.7%。RNA在硫酸銫中的浮力密度為1.60 ~ 1.615g/ml，在蔗糖梯度溶液中的沈降系數為14S。病毒的鉑蛋白根據大小可分為三個等級。最大的多肽重105 000道爾頓，占整個分子量的4%，是壹種與RNA相連的聚合酶。中等大小的多肽重54 000道爾頓，占總重量的62%。它是主要的衣殼蛋白，抗體由它產生。兩種內部小蛋白的重量分別為365，438+0，000道爾頓，分別占28%和29，000道爾頓，占總重量的6%。已知的毒株有VR299、Sp、Ab、He等。這些菌株在血清學、敏感性和致病性方面有些不同。據蔣玉林等(1989)報道，我國陜西省分離的IPNV在血清學交叉中和反應中，與IPNV-Sp株抗血清發生強交叉反應，顯示為IPNV-Sp株。佟尚良等(1990)報道IPNV-VR 299株分離自山東。
病毒易在RTG-2、PG、RI、CHSE-214、AS、BP-2、EPC等魚類細胞系和CPE上增殖；出現。而在CAR、CLC、CO等魚類細胞系上接種，未出現CPE，病毒滴度也較低。生長溫度為4-27.5℃；如果培養過程中溫度上升較慢，病毒可在30℃生長；最適生長溫度為15 ~ 20℃。病毒在細胞質中合成並成熟，形成包涵體。病毒在RTG-2細胞株上生長，在24℃下5小時內產生新病毒，而在65438±05℃下需要8小時產生新病毒，但在此溫度下產生的病毒量更多。病毒引起RTG-2細胞病變，病變出現在感染後9小時的26℃，感染後18小時的20℃，幾天後的4℃。在20℃下，2 ~ 3天可見空斑、核濃縮、細胞伸長、相互分離並與瓶壁分離。而在抗病毒能力強的細胞中，細胞核雖已萎縮，但仍附著在瓶壁上，故斑塊多呈網狀，尤其是斑塊邊緣，健康細胞和變性細胞相互混雜。Ab株不能在FHM細胞系上生長。
IPNV對乙醚和氯仿不敏感，對甘油也非常穩定，能保證在50%甘油中存在數年以上(法國Kerlo株在4℃3個月內失去感染性)；pH的耐受範圍為4 ~ 10；能耐高溫，在60℃的生理鹽水中滅活30分鐘；在4℃過濾滅菌的水體中，傳染性可維持5 ~ 6個月以上；在10℃的自來水中，可保存7個月以上，但在未經處理的有藻類的水中，14天後不能檢出病毒；大多數植物能耐受20℃以下的低溫，凍幹後可在4℃保存至少4年而不喪失傳染性。對酸不敏感，在pH 3中30分鐘後感染率為100%；對堿敏感，pHll感染率僅為0.01%。氯、福爾馬林、碘、臭氧、pH在壹定濃度和時間下都有殺滅病毒的作用。
病毒能在培養細胞上誘導幹擾素，VR299株在FHM細胞系上誘導幹擾素的量依賴於溫度。15℃、20℃、26℃和30℃中，26℃的幹擾素產量最高:幹擾素對熱、pH不敏感，具有非透析性，高速離心下不沈澱，活性易受胰蛋白酶和胰蛋白酶影響。？巰基乙醇對DNA和RNase有抗性。在RTG-2細胞系上產生的幹擾素的分子量估計為94 000道爾頓。
2.流行
敏感魚有美國紅點鮭、虹鱒、河鱒、黃花魚、銀鮭、玫瑰鮭、湖紅點鮭、大西洋鮭、大鱗鮭等。主要危害14 ~ 70日齡的魚苗和魚種。水溫在10 ~ 12℃時，病程可分為急性型和慢性型。急性型幾天內可全部死亡，慢性型每天死亡壹點，持續時間長。1歲的魚雖然也有病，但是病情較輕。壹般全長超過15cm的魚不太可能發病，多為隱性感染。
最主要的傳染源是帶病毒的成魚，剩下的魚可以成為病後數年甚至終身的病毒攜帶者。IPNV在腎臟、脾臟、肝臟、性腺和糞便中均可檢出，其中以腎臟檢出率最高。此外，在20個科的魚類中也發現了IPNV，從輪蟲到硬骨魚，肉眼觀察大部分魚類正常。IPNV；也從軟體動物、甲殼動物和魚類寄生吸蟲的囊蚴中分離到。在給雞、貓頭鷹、海鷗和雪貂人工餵食IPNV後，在它們的糞便中檢測到了傳染性IPNV，這表明它們也可能是IPN的傳播者。河水和井水中的IPNV在4℃可維持10天，在15℃可維持5天。妳在線嗎？在4 ~ 10℃的海水中，4 ~ 10周後幾乎沒有感染性喪失，5 ~ 6個月後99%；室內幹燥5周後，仍有少量傳染性殘留，因此水和空氣都可能是傳播媒介。IPNV可通過卵垂直傳播，也可隨病魚的糞便、尿液和性腺分泌物排入水中進行水平傳播。通過腮和嘴感染。潛伏期的長短與魚種的大小和水溫有關。魚的種類越大，潛伏期越長。在適合病毒生長的溫度範圍內，溫度越高，潛伏期越短。如水溫12 ~ 14℃時，魚苗在感染後5 ~ 8天發病並同時開始死亡，較大的魚在10 ~ 12天開始死亡。
IPN首先發生在加拿大和美國，隨後流行於丹麥、法國、希臘、捷克斯洛伐克、英國、德國、挪威、意大利、南斯拉夫、瑞典、日本等國。20世紀80年代，IPN傳入朝鮮、中國臺灣省、中國東北、陜西、山東、甘肅等地。是漁港檢疫的第壹檢疫對象。
3.癥狀
病魚遊動失去平衡，經常垂直遊動，很快沈入水底。等待壹段時間後，它們重復上述遊泳動作，直到死去。壹般從開始遊泳到死亡只需要1 ~ 2小時。流水池中失去遊動能力的病魚聚集在排水溝的阻擋網上。患病魚體色黑色，眼球突出，腹部腫脹，腹部和鰭基部充血，鰓發紅，肛門上常拖1線狀粘液便。有時剖開魚肚可見腹水、幽門出血、肝、脾、腎、心異常蒼白；消化道內通常無食物，但有乳白色或淡黃色粘液，在5 ~ 10%福爾馬林中通常不凝固，有診斷價值。
4.病變
最明顯的特征就是胰腺壞死。胰腺囊泡、胰島和所有細胞幾乎都是異常的。大部分細胞壞死，尤其是核濃縮和碎裂，部分細胞胞質內有包涵體。Kudo等人(1973)在光鏡下觀察到的細胞內包涵體及其類似物，經電鏡證實為細胞溶酶體，不僅包括病毒顆粒，還包括變性的細胞器。IPNV存在於胰腺腺泡細胞、肝細胞和庫普弗細胞的細胞質中，巨噬細胞和遊走細胞的細胞質中也有病毒顆粒滲入胰腺。胰腺周圍的脂肪組織也壞死了，骨骼肌變得像玻璃壹樣。疾病晚期，腎臟的造血組織和腎小管也變性壞死，肝臟局部壞死，消化道黏膜變性壞死、脫落。
5.診斷
(1)根據癥狀和疫情初步診斷。首先觀察病魚是否易患傳染性胰腺壞死，然後根據病魚的遊泳行為及其特有的內外癥狀進行初步判斷。病魚的內臟——子宮通常呈蒼白色，特別是腸內無食物，但有許多粘液樣物質，在5 ~ 10%福爾馬林中不凝固，可增加本病診斷的準確性。同時，要調查魚卵和魚種的來源、水源狀況和疾病史。
(2)胰腺壞死可通過病理檢查發現，但如果病魚有IHN、VHS那樣的腎、肝、腸病變，則難以診斷，而IPN不像IHN那樣有消化道顆粒細胞壞死現象。
(3)用RTG-2細胞株分離病毒，觀察CPE，以便進壹步診斷。但當出現混合感染時，如IPN和VHS混合感染，則接種在RTG-2細胞系上。24小時後，CPE與IPN相似，48小時後，CPE與VHSV相似。此時需要進行乙醚、甘油和pH的敏感性試驗，RTG-2細胞株上的IPNV在pH 7.2 ~ 7.6出現明顯的CPE，對乙醚不敏感，對甘油穩定。另壹方面，RTG-2細胞系上的VHSV在pH7.2時不顯示或不顯示CPE，在pH7.6時顯示明顯的CPE，對乙醚敏感，並在50%甘油中失去感染性。
(4)最終診斷
①中和試驗，由於IPNV血清型眾多，需要使用多價抗血清進行診斷。美國東方魚病研究所現已制備多價抗IPNV血清(7株)。
②補體結合法，利用已知的病毒可溶性抗原來確定病魚血清中是否有相應的抗體，比中和試驗特異性低，但由於補體結合抗原出現早，消失快，可用於早期診斷。
③直接熒光抗體法能快速、準確地檢測組織和培養細胞中的病毒。在20℃培養3 ~ 4小時的RTG-2細胞可檢測到，血清型Pi在同壹株植物中保存不會引起交叉反應。
(4)酶聯免疫吸附試驗(ELISA)，在發病季節，24小時內可確認疫情是否由IPNV引起，48小時內可確定魚卵是否被IPNV汙染；？對於沒有疲勞外觀的成魚，大約24小時就可以檢測出血液中是否有抗IPNV抗體。該方法具有速度快、靈敏度高的優點。特異性強、操作方便等優點。中國科學院水生生物研究所魚病寶病毒組已經制備了試劑盒。
5、防治方法
(1)強化綜合防範措施，嚴格執行檢疫制度，不得用IPNV出口或運輸魚卵、魚苗、魚種、親魚。
(2)發現疫情時，必須對魚類進行徹底消毒，魚塘必須用濃度為200×10-6的有效氯消毒；在8 ~ 10℃時，用2%福爾馬林或氫氧化鈉溶液(pH12.2)消毒10分鐘。
(3)建立基地，養殖無IPNV的魚種，禁止混養未經檢疫的其他魚種。
(4)用碘伏水溶液(聚維酮碘，PVP-I，商品名:10%復方匹維碘溶液)消毒毛眼卵，濃度為50×10-6，藥浴時間為15分鐘；如果水的pH值較高，濃度應為(60 ~ 100) × 10-6。用這種方法處理的魚卵孵化出的魚苗有時仍有IPN，IPNV可能仍在卵內或卵表面藥液難以到達的某些部位。
(5)發病初期，PVP-I混合投餵，每天每公斤魚有效碘為1.64 ~ 1.91g，連續投餵15天可降低死亡率。
(6)水溫在65438±00℃以下時，壹般可減少IPN的發生和死亡率。因此，可以在低水溫環境下飼養病魚，以控制疾病的發展，也可以在發病季節在低水溫下飼養易感幼魚，發病期過後再搬回來，但這種方法難以推廣。
(7)大黃等中草藥混食，有預防作用。
(8)2 500只0.4g仔魚分兩次投餵6mg植物血凝素，間隔65438±05天。據報道，它對預防IPN有壹定效果。
二。傳染性造血器官壞死(IHN)
1，病原體
傳染性造血組織壞死病毒屬於彈狀病毒。彈丸狀，大小120 ~ 300× 60 ~ 100 nm，單鏈RNA，對乙醚、甘油、氯仿敏感，有包膜；漂浮密度(硫酸銫)為1.59g/cm3(本文已被訪問5216次)。